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鸡卵泡颗粒细胞的保存方法

阅读人数:428 发布时间:2019/7/25 18:17:06

 细胞简介:

        鸡卵泡颗粒细胞分离自 PMSG 诱导后 3 天的鸡卵巢组织,颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞,其增殖与分化直接影响着卵泡的生长启动、发育、排卵、黄体形成以及甾体激素分泌等卵巢功能活动。细胞形状呈圆形或椭圆形。本公司生产的鸡卵泡颗粒细胞采用机械分离法制备而来,细胞总量约为 5×105 个/瓶,细胞纯度可达 80%以上,且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

        一、使用方法

        客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代,建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1.取出细胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2培养箱中静置 6-8 小时,以稳定细胞状态。

2.待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3.细胞传代:

1)吸出细胞瓶中的培养基,用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%胰蛋白酶消化液约 1mL 至培养瓶中,37℃消化 3min 左右;显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀,按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至 5mL,放入 37℃ 5% CO2培养箱中培养。

4)待细胞完全贴壁后,培养观察,每隔 2-3 天更换新鲜的完全培养基。

        二、注意事项

1.培养基于生化培养箱4℃条件下可保存 3-6 个月。

2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3.传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4.该细胞只可用于科研。

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